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SABC-POD免疫组化染色试剂盒(大鼠IgG)图片
产品货号:
ZN1840
中文名称:
SABC-POD免疫组化染色试剂盒(大鼠IgG)
英文名称:
Concentrated SABC-POD IHC Kit(Rat IgG)
产品规格:
400T|800T|1600T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本试剂盒采用SABC-POD系统,适于一抗为大鼠来源抗体的免疫组化实验。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链酶亲和素是一种从链酶菌中提取的蛋白质,分子量60000。同亲和素一样,对生物素分子有极高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍。等电点接近中性,这些特点使链酶亲和素的非特异吸附很低。因该方法的中心是StreptAvidin-Biotin-enzyme Complex,故命名为SABC。根据研究,每个SABC复合物由一百多个过氧化物酶分子和几十个链酶亲和素分子构成。由于有大量的酶分子组成放大系统,因此SABC有很高的敏感性。SABC兼具高敏感性,低背景和操作简便的优点。


本试剂盒为浓缩型,需稀释后使用,试剂盒包含三个滴瓶供稀释试剂用,稀释液可选用TBS或PBS缓冲液。




组分400T800T1600T稀释比例
兔血清封闭液2.5mL5mL10mL1:10
生物素标记兔抗大鼠IgG0.25mL0.5mL1mL1:100
SABC(链霉亲和素-过氧化物酶复合物)0.25mL0.5mL1mL1:100

保存:4℃可保存一年,应避免冷冻。


  • 粘片剂APES(ZN1946)或POLY-L-LYSINE(ZN1945)。
  • EDTA修复液(ZN1951)。
  • 0.02M PBS(pH7.2~7.6)配法(ZN2950):1000mL蒸馏水中加氯化钠9g,Na2HPO4·12H2O 7g,NaH2PO4·2H2O 0.5g。
  • 0.01M枸橼酸盐缓冲液(ZN1955):1000mL蒸馏水中加枸橼酸三钠(C6H5Na3O7·2H2O)3g,枸橼酸(C6H8O7·H2O) 0.4g。
  • DAB显色试剂盒(ZN2968)。



注:免疫组化染色程序的选择:用户需根据抗原/抗体的特点确定程序,多数情况下要先比较各程序染色结果。
  A程序:石蜡切片热修复抗原程序。促进某些位于蛋白质内部的位点暴露。
  B程序:石蜡切片酶消化程序。促进某些被固定遮避的抗原位点暴露。
  C程序:石蜡切片不消化/不修复程序。适于稳定的抗原。
  D程序:细胞涂片,冰冻切片染色程序。

  • 石蜡片热修复染色步骤:
    • 石蜡切片,常规脱蜡至水。
    • 3% H2O2去离子水室温孵育5~10min,以消除内源性过氧化物酶活性。PBS(ZN2950)冲洗,
      5min×3次。
    • 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
    • 热修复抗原:将切片浸入到EDTA修复液中,微波炉加热到沸腾后断电,间隔5~10min再修复1~2次,冷却。
    • 滴加兔血清封闭液,37℃孵育30min,甩干,勿洗。
    • 滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5min×3次。
    • 滴加生物素标记兔抗大鼠IgG,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
    • 滴加SABC,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
    • 显色:镜下控制反应时间。显色剂可选DAB (ZN2968)或AEC (ZN1963)。自来水充分冲洗。
    • 苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5~2min。脱水,透明。
    • 选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。
  • 石蜡片酶消化染色步骤:
    将A程序的第4步:滴加酶消化液室温5~10min。酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。蒸馏水洗2min×3次。
  • 石蜡切片酶不消化/修复程序:
    对于不需要微波修复或消化的抗原,省略A程序中的第4步即可。
  • 细胞片的染色步骤:
    • 爬片。圆形盖破片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine),灭菌,备用。贴壁细胞消化后加入放有盖玻片的24孔板中培养1~2天,使细胞贴壁。悬浮细胞则处理后直接涂片,使细胞贴附。
    • 固定。4℃预冷4%多聚甲醛固定20min或冷丙酮固定10min。蒸馏水洗2min×3次。
    • 3% H2O2去离子水室温孵育5~10min,以消除内源性过氧化物酶活性。PBS(ZN2950)冲洗,5min×3次。
    • 打孔。0.25% Triton X-100处理细胞15min。(若采用丙酮固定则此步骤可省略)
    • 酶消化处理室温5~10min。酶消化可选用复合修复液(ZN1952)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)。蒸馏水洗2min×3次。
    • 滴加兔血清封闭液,37℃孵育30min,甩干,勿洗。
    • 滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5min×3次。
    • 滴加生物素标记兔抗大鼠IgG,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
    • 滴加SABC,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
    • 显色:镜下控制反应时间。显色剂可选DAB (ZN2968)或AEC (ZN1963)。自来水充分冲洗。
    • 苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5~2min。脱水,透明。
    • 选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。

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